I12寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 Ningxia Med J,Feb27,No.2文章編號:1001-5949(2005)02-0112-03實(shí)驗(yàn)研究·乙醇提取苦瓜皂甙的工藝研究孫磊摘要]目的采用乙醇提取苦瓜皂甙,確定最佳工藝。方法采用單因素和正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取苦瓜皂甙的最佳工藝,建立合理可靠的提取條件。結(jié)果最佳提取溫度70℃、溶劑用量為苦瓜的9倍量,提取時間3小時、乙醇濃度60%。結(jié)論工藝可行、合理[關(guān)鍵詞]苦瓜皂甙;乙醇;提取[中圖分類號]R284.2[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]AStudy for technology of extracting balsamper glycoside with ethanolSUN Lei. College of phamacy Harbin University of commerce)[Abstract] Objective Adopt ethanol as the solevent to extract balsamper glycoside, and established the optimum process. MethodsSingle-factor and orthogonal design were used to choose the optimum extraction process. So as to ensure the reasonable and reliable extractingcondition Results The optimum temperature is 70, the solvent is 9 times of the balsamper, the extracting time is 3 hours the concentration ofthe ethanol is 60%. Conclusion the process is available and reliableKey words] Balsamper glycoside; Ethanol; Extraction苫瓜系葫蘆科苦瓜屬植物的果實(shí),又名涼瓜、癩0.10、0.15、0.200.25、0.30ml分別置于具塞試管中,瓜。含有苦瓜素甙F1、I、G、胡蘿卜甾醇等活性成水浴揮去溶劑,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶分,含苦瓜甙(為β-谷甾醇-β-D-葡萄糖甙和5、液0.2ml,高氯酸0.8ml。在60℃水浴中加熱15分25、-豆甾二稀醇-3-葡萄糖甙的等分子混合物)、鐘,流水冷卻,加冰乙酸5ml,搖勻,在15mn內(nèi)于波長苦瓜蛋白、5-羥基色胺、多種氨基酸、果膠、類胰島548m處分別測吸光度,結(jié)果見表1。另取無水乙醇素或稱植物胰島素( Plant insuliu)等?？喙闲晕犊嚯S行空白對照(取0.35m于具塞試管中,水浴揮去溶寒,具有消暑滌熱、明目解毒之功效。藥理研究表劑)。以吸光度(A)為縱坐標(biāo),人參皂甙Rgl濃度(C)明,苦瓜具有降血糖、抗生育、抗突變、抗菌、免疫調(diào)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)統(tǒng)計處理,得線形回歸節(jié)和抗HV等作用5。關(guān)于苦瓜皂甙的藥理作用方程為:Y=0.002x+0.0135,r=0.994的研究已取得了很大進(jìn)展,但苦瓜皂甙提取工藝的表1人參皂甙Rg1標(biāo)準(zhǔn)品濃度與吸光度研究尚少見報道,本實(shí)驗(yàn)研究了用乙醇提取苦瓜皂體積(m)0.00.050.100.150.200.250.90甙,并確定了最佳提取條件。濃度(風(fēng)gn0255075100125150材料與方法吸光度00.0740.1320.1830.2260.2790.3371.1一般資料:苦瓜(購自哈爾濱第一百貨商場),人參皂甙Rg1標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所)。2.2苦瓜皂甙的測定:將苦瓜洗凈、去籽、切片、烘2方法:采用單因素和正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取苦瓜干、粉碎、脫脂、烘干,用乙醇回流提取。將提取液抽皂甙的最佳工藝。儀器為721分光光度計(上海第三濾、過濾,在60℃水浴中濃縮,然后用無水乙醇定容分析儀器廠),XT系列原裝天平(瑞士 PRECISA公至10ml,過濾,取1ml濾液于具塞試管中,用無水乙司)。醇再定容至10ml,取0.2ml于具塞試管中,在60℃水1.3統(tǒng)計方法:通過正交實(shí)驗(yàn)表做方差分析得到結(jié)浴中揮去溶劑,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶論液0中國煤化工℃水浴中加熱15分2結(jié)果鐘勻,在15分鐘內(nèi)于波CNMH21標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密稱取人參皂甙R1的標(biāo)長54x兒度乙醇0.35ml作空白準(zhǔn)品2mg,加無水乙醇溶解定容至4ml,搖勻,作為對對照)。照品溶液。精密吸取上述對照品溶液0.05、2.3單因素的確定[作者單紛蛟「商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院,黑龍江哈爾濱1500762.3.1不同乙醇用量提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 Ningxia Med J,Feb.2005,vo27,N.2l13瓜粉末于4個提取瓶中,然后向其中分別加入料液用量、提取時間、誤差為4因素,選取3個水平進(jìn)行實(shí)比為1:7、1:8、1:9、1:10的80%的乙醇,在80℃水浴驗(yàn)。因素水平見表6,正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表7。中回流提取3小時。測吸光度(見表2表6因素水平表2不同乙醇用量提取苦瓜皂甙的結(jié)果水平用量產(chǎn)量(g)得率%吸光度提取溫度(℃)料液比(wy)提取時間(b)1:70.01030.520.2401:80.01081:91:90.01230.620.2851:10表7L(3)正交試驗(yàn)設(shè)計及結(jié)果23.2不同乙醇濃度提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦甙含量瓜粉末于4個提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的40%、60%、80%、95%的乙醇,在80℃的水浴中回流14.746提取3小時,測吸光度(見表3)。12.379表3不同乙醇濃度提取苦瓜皂甙的結(jié)果14.594濃度%產(chǎn)量(g)得率%吸光度2345678922233332313121233122313.7l0.00850.430.20211.1970.000.460.2130.008038.79534,1403840.67443.26041.47539.64539.46841.53839.27639.7823.3不同提取時間提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦1293211,380瓜粉末于4個提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的k213.55814.42013.82513.21560%的乙醇,在80℃的水浴中分別回流提取2h、3h、k13.15613.84613.09213.261極差R0.6263.0401.070.0914h、Sh,吸光度結(jié)果見表4。優(yōu)水平表4不同提取時間提取苦瓜皂甙的結(jié)果時間(h)產(chǎn)量(g)得率%吸光度將上述結(jié)果做方差分析,結(jié)果見表80.01260.290表8方差分析30.01270.640.2920.01230.62誤差來源“差半方和自由度方差比臨界值顯著性貢獻(xiàn)率0.01170.560.2700.604246.46219.000B15.64921203.769193%023.4不同溫度提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦瓜粉末于4個提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的誤差Enor0.0100.0058.13760%的乙醇,分別在50℃、60℃、70℃、80℃的水浴中回流提取3小時,測吸光度(見表5)。結(jié)果顯示,乙醇的濃度對苦瓜皂甙吸光度的影表5不同溫度提取苦瓜皂甙的結(jié)果響最小,可以視為誤差列。其他3個因素,通過方差溫度℃產(chǎn)量(g)得率%吸光度分析,對苦瓜皂甙含量均有非常顯著的影響,并確定0.01140.570.2650.01170.59最佳提取工藝條件為:A2、B2、C20.01440.723討論0.0129中國煤化工提取工藝進(jìn)行了研究,通HHsCNMHG了最佳提取工藝的條件2.4正交實(shí)驗(yàn):根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇影響苦為取∪,乙用里為苦瓜的9倍量,提取瓜皂甙類化合物提取效果各因素中有意義的水平做時間為3小時,乙醇濃度為60%。通過對實(shí)驗(yàn)結(jié)果正交實(shí)驗(yàn),對結(jié)果進(jìn)行極差和方差分析,以確定最佳的分析確定了影響因素的主次:料液比→提取時間的提勢秀皴果用L(3)正交表,以加熱溫度、劑→提取溫度,保證了最大限度地提高提取率。用乙寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 Ningia Med J,Feb.205,V27,N醇作為提取溶劑,而不用甲醇,是考慮到它的安全性,同時乙醇價廉,可以用于工業(yè)上大量的生產(chǎn)提31江蘇新醫(yī)學(xué)院中藥大辭典(上冊)M.上海:上海科技出版社[4】孫寶瑩.苦瓜皂甙的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[J」.河南中醫(yī)藥學(xué)刊[參考文獻(xiàn)]94,9(6):19]姜瑴苦瓜皂甙降糖作用的臨床觀察J實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志,[5]張旭忠.苦瓜抗菌作用的研究[.中草藥,1995,26(10):561996,9(3):179[收稿日期]2004-11-15[責(zé)任編輯]楊自革[2]陳慶全.實(shí)用臨床草藥[M].第2版.福建:暨南大學(xué)出版社文章編號:1001-5949(2005)02-0114-01子宮體血管外皮肉瘤1例沈華[關(guān)鍵詞]子宮體;皮肉瘤[中圖分類號]R713.42[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B1病例資料廣泛子宮全切術(shù),術(shù)后剖開子宮,肌層呈均勻性增厚,切面呈患者女,38歲,孕6產(chǎn)4,主因月經(jīng)周期縮短,月經(jīng)量增多灰白色海綿狀改變宮腔未見異常,剖開后壁凸出腫物及左側(cè)5年,加重20天,于2002年9月13日急診入院。包裹卵巢及輸卵管,內(nèi)見腦漿樣組織流出,剖開左側(cè)骨盆漏斗患者既往月經(jīng)周期規(guī)律,經(jīng)量正常,痛經(jīng)(-)。5年前無韌帶,內(nèi)有瘤栓形成。常規(guī)送病檢,術(shù)后2天,術(shù)前病檢結(jié)果:明顯誘因出現(xiàn)月經(jīng)周期縮短,經(jīng)期延長,經(jīng)量較前明顯增多。送檢組織中血管彌漫增生血管間充血,血管周圍細(xì)胞緊密排經(jīng)期伴下腹墜痛及腰骶部脹痛,曾在院外多次診治,效果不列整個組織呈息肉狀,外皮有柱狀或立方上皮被覆?？紤]子佳。末次月經(jīng)2002年8月23日,陰道流血至入院,量多,未見宮血管外皮瘤。術(shù)后病理診斷:①子宮體血管外皮肉瘤有壞爛肉樣組織及水泡狀物排出,近3天出現(xiàn)頭暈、眼花、陰道大死,卵巢、輸卵管、韌帶及另送組織中均見侵犯轉(zhuǎn)移,肌間淋巴量流血,故急診入院。既往體健,無手術(shù)及外傷史,無咳嗽咳管中有瘤栓;②宮頸黏膜慢性炎。痰,無明顯消瘦及體重減輕,大小便正常。2討論查體:BP80/50mmHg,發(fā)育正常,營養(yǎng)中。重度貧血貌。血管外皮瘤是一種起源于血管外皮細(xì)胞的腫瘤,它的生婦科檢查:外陰發(fā)育正常,婚產(chǎn)型。陰道內(nèi)有暗紅色血液,量物學(xué)行為可有良性,惡性之分,但其組織形態(tài)目前尚無定論。多。宮頸肥大、光滑、質(zhì)硬。宮體約孕3個月妊娠大小,凸凹本瘤較為少見,本瘤可發(fā)生于任何年齡組患者,男女性別的分不平,質(zhì)硬,活動欠佳,觸痛明顯。于左側(cè)附件區(qū)可觸及約布無明顯差異。本瘤可發(fā)生于身體的任何部位,但以下肢、腹4cm×3cm大小腫物囊性感,與子宮關(guān)系密切,右附件區(qū)未觸膜后和頭頸部為最常見。多見于深部肌肉、深筋膜甚至累及及明顯異常。骨膜,發(fā)生于子宮者罕見,臨床未見報道過。該瘤的病程長輔助檢查:①B超:宮體前位,體積增大,輪廓不規(guī)則,宮不一,從數(shù)年至數(shù)十年,生長緩慢,臨床上早期多表現(xiàn)為無痛壁回聲不均勻。在后璧可見大小約5.2cm×3.3cm實(shí)性包塊,性腫塊,隨著病變的發(fā)展,周圍臟器可因腫瘤體積的增大而產(chǎn)邊界欠清,內(nèi)回聲不均勻,可見片狀液區(qū)回聲。另在前壁近宮生壓迫或浸潤的癥狀;子宮肉瘤罕見,是一種惡性程度極高的頸處見2.4cm×2.2m低回聲包塊,邊界欠清。超聲診斷:子女性生殖器官腫瘤,子宮肉瘤是來源于子宮肌層或肌層內(nèi)的宮多發(fā)性實(shí)性包塊(考慮子宮肌瘤);②血常規(guī):HB7g1,其結(jié)締組織或子宮內(nèi)膜的結(jié)締組織,約占子宮惡性腫瘤的2%余各項(xiàng)值正常;③胸部X線片:未見異常。4%,好發(fā)于絕經(jīng)后的婦女,子宮肉瘤最主要的突出癥狀,陰入院診治:①子宮多發(fā)肌瘤;②失血性休克;③失血性貧道不規(guī)則流血,量或多或少,下腹部包塊迅速增大,晚期肉瘤血。入院后積極治療休克,2小時后患者血壓1007mk。向周圍組織浸潤,并壓迫周圍組織或臟器,即引起下腹痛及腰般情況好轉(zhuǎn),急行清宮術(shù),術(shù)中探宮腔13cm,感宮腔內(nèi)平滑痛等,當(dāng)壓迫直腸、膀胱時即出現(xiàn)相關(guān)臟器被壓迫的癥狀,癌刮出少許內(nèi)膜組織送病檢〔本院無快速冰凍切片)。于入院第轉(zhuǎn)移至腹膜或大網(wǎng)膜時可出現(xiàn)血性腹水疾病后期,患者往往2天,患者陰道流血量又劇增,故急行全子宮切除術(shù),術(shù)中見有惡液質(zhì)、消瘦繼發(fā)性貧血等全身衰竭現(xiàn)象。子宮增大約3個月妊娠大小,質(zhì)硬,于子宮后壁可見一約5cm具十邐的密心埕月經(jīng)周期短,月經(jīng)量增×3cm大小腫物凸出,似漿膜下肌瘤但與宮壁界限不清,質(zhì)多中國煤某化二病年齡,臨床癥狀及體脆。左側(cè)輸卵管增粗約拇指狀變短,傘端與該側(cè)卵巢包裹形征完CNMHG見,致使入院時診斷有成盲端,增大約5cm×4cm×3am。左側(cè)骨盆漏斗韌帶增粗,呈誤,但術(shù)中發(fā)現(xiàn)有惡變傾向,故手術(shù)范圍選擇恰當(dāng),未延誤治黑紫色,左側(cè)主韌帶增厚,肉眼觀有惡變傾向。故行次療。該瘤易轉(zhuǎn)移至肺部,故應(yīng)常規(guī)行肺部Ⅹ線攝片,術(shù)后常規(guī)化療。作者鄔月聶市人民醫(yī),寧夏園頭7360[收稿日期]2004-07-26[責(zé)任編輯]楊自革