Journal of Silk第50卷No23213年09月第09期研究與技術(shù)o:10.3969/j.issn.1001-7003.2013.09.001乙二醇/絲素蛋白共混膜的研究錢巧芬,張珊珊,侯靜,吳琪,盧神州(1.蘇州大學(xué)紡織與服裝工程學(xué)院,江蘇蘇州215123;南通蘇州大學(xué)紡織研究院,江蘇蘇州215123)摘要:將絲素蛋白水溶液和乙二醇混合,制備透明絲素蛋白共混膜。用X射線衍射、紅外光譜法對(duì)共混膜的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,并測(cè)定其溶失率、學(xué)性能及透光率,考察了其酶降解性能。在透明膜上培養(yǎng)L929細(xì)胞并對(duì)其黏附率和增殖進(jìn)行測(cè)定,察其生物相容性。研究表明:乙二醇能誘導(dǎo)絲素蛋白由無規(guī)結(jié)構(gòu)向 Silk結(jié)晶結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,并且共混膜的溶失率得到了極大的改善,透光性良好。當(dāng)乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%時(shí),共混膜柔韌性最好。試驗(yàn)表明,透明絲素蛋白膜具有較好的生物降解性,能夠很好地支持角膜成纖維細(xì)胞在其上的黏附與增殖,細(xì)胞相容性良好。關(guān)鍵詞:絲素蛋白;透明;乙二醇;膜中圖分類號(hào):TB383文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1001-7003(2013)09-0001-06 Study on Ethylene Glycol/Silk Fibroin Blend Membrane (1. College of Textile and Clothing Engineering, Soochow University, Suzhou 215123, China; 2. Nantong Textile Institute of Soochow University, Suzhou 215123, China) Abstract: This study blends aqueous solution of silk fibroin and ethylene glycol and prepares transparent silk fibroin blend membrane; analyzes the structure of the blend membrane with X-ray diffraction and infrared spectroscopy nd investigates its enzymatic degradation property; cultures L929 cell on the transparent membrane, measures its adhesion rate and proliferation and investigates its hat ethylene glycol can induce silk fibroin to transform from disordered structure into Silk crystal ne has been greatly improved; it has a good light-admitting quality. When the mass fraction of ethylene glycol is 30%, the blend membrane has the best flexibility. The test shows that transparent silk fibroin membrane has a good biodegradability and cytocompatibility and can well support the adhesion and proliferation of fibroblast on it Key words: silk fibroin; transparent; ethylene glycol; membrane幾個(gè)世紀(jì)以來,蠶絲作為一種紡織材料,因其特級(jí)和納米級(jí)的絲素纖維、絲素膜、絲素水凝膠、多孔殊的光澤和良好的機(jī)械性能而廣為人知。蠶絲能材料、球狀骨針、膠囊等3一般認(rèn)為,絲素蛋白除被溴化鋰硫氰酸鋰硫氰酸鈣、氯化鈣等的濃溶液了無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu),還存在 Silk和SilkⅡ兩種結(jié)晶結(jié)溶解(21,從而加工成其他形態(tài)的材料,如直徑為微米構(gòu)。研究表明,濕熱法、有機(jī)溶劑法和拉伸處理法能夠促使絲素蛋白從無規(guī)卷曲向B-折疊結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變4,收稿日期:201303-11最終使得絲素蛋白材料不溶于水。得益于其良好的基金項(xiàng)目:國(guó)家自然基金(1203107):南通市科技計(jì)劃項(xiàng)目生物相容性,很多種類的細(xì)胞能在絲素膜上生長(zhǎng)(BK2012095)教育部留學(xué)回國(guó)人員科研啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目人角膜內(nèi)皮細(xì)胞可以在絲素膜上生長(zhǎng),表明絲素膜(K510212作者簡(jiǎn)介:錢巧芬(1989),女,碩士研究生,研究方向?yàn)榭梢杂糜诮悄ひ浦踩私悄こ衫w維細(xì)胞在絲素膜絲素蛋白材料。通信作者:盧神州,副教授 lushenzhou@及絲素多孔材料上培養(yǎng)結(jié)果表明,絲素蛋白材料對(duì) suda.edu.cno角膜組織的修復(fù)有重大的利用價(jià)值。但是絲素溶1第50 Journal of Silk液直接澆鑄在基質(zhì)上,待液體揮發(fā)并最終轉(zhuǎn)變?yōu)楣?.3溶失率測(cè)定相,得到的絲素膜脆性較大,強(qiáng)度不夠,且易溶于將共混膜在恒溫恒濕(25℃,相對(duì)濕度65%)下水,使其應(yīng)用于角膜的修復(fù)受到限制。因此,如何平衡24h,每個(gè)稱取質(zhì)量W1(g)的樣品3塊然后在改善絲素蛋白膜的水溶性及透明性,使其更加符合烘箱中105℃烘至恒重。稱重得到W2(g)。含水率人角膜移植的要求是目前角膜組織修復(fù)的一個(gè)熱C的計(jì)算公式:點(diǎn)。目前有些文獻(xiàn)采用絲素蛋白與其他化合物或天C/%=1-W2×100(1)然高聚物共混合來改善其水溶性及生物相容性。W絲素蛋白溶液與山梨醇或肌醇共混,可以制備出不將共混膜在恒溫恒濕(25℃,相對(duì)濕度65%)環(huán)溶于水的透明絲素膜101,但是兩種共混膜只能在干境中平衡24h,然后準(zhǔn)確稱取0.1g左右的樣品W1,態(tài)下保持較好的透光率,在濕態(tài)時(shí)透光率不理想,使放入錐形瓶中,按浴比1:100加入去離子水,37℃水其在角膜修復(fù)工程上的應(yīng)用受到了限制。因此,需浴預(yù)熱30min后在37℃的水浴恒溫震蕩器中震蕩24h,然后取出溶液。用 Smartspec型紫外分光光度要尋求一種醇類化合物,在將其與絲素蛋白混合后,計(jì)測(cè)出溶液在278nm下的吸光度A。共混膜的絲素共混膜在干、濕態(tài)都能保持良好的透光率。蛋白溶失率D計(jì)算公式:將一定比例的聚乙二醇混入絲素膜可使膜在保持原有良好生物性質(zhì)前提下改善膜的柔韌性,且透D/%xv(1-C)W×100(2)光性較好,但因其聚合物相對(duì)分子量較大,故與絲素式中:K為絲素溶液的紫外吸光常數(shù),K=1.1026的可混性稍差。因此,本文考慮采用相對(duì)分子量剩下的絲素膜固體用去離子水沖洗3遍后放入較小的乙二醇,與絲素共混的方法制得絲素蛋白透105℃烘箱中烘干得W2。共混膜的質(zhì)量溶失率Z計(jì)明共混膜,對(duì)其結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行了研究,并在其上培算公式:養(yǎng)L929細(xì)胞,研究其生物相容性。%(1-C)×W1-W2100(3) (1-C)1試驗(yàn)與方法1.4力學(xué)性能測(cè)試1.1絲素蛋白共混膜的制備使用美國(guó) Instron3365型萬能材料試驗(yàn)機(jī)進(jìn)行測(cè)家蠶生絲置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%的Na2CO3溶試,拉伸速度為20mm/min,夾距為28mm,試樣是按照GB/T10402006標(biāo)準(zhǔn)工字3型刀具壓出的樣條。液中,于98~100℃處理30min,重復(fù)3次,脫去生絲測(cè)試干態(tài)強(qiáng)力前將樣條在恒溫恒濕(25℃,相對(duì)濕度中的絲膠。洗凈干燥后的純絲素纖維在65℃下溶解65%)中平衡24h;濕態(tài)強(qiáng)力測(cè)試則是將樣品于生理于9.3mol/L的溴化鋰溶液中,透析3d后過濾得到鹽水中浸泡24h后,取出擦干測(cè)定。純絲素溶液。1.5透光率測(cè)定取40mL絲素溶液,按乙二醇/絲素質(zhì)量分?jǐn)?shù)分將共混膜平鋪置于24孔板板底,用酶標(biāo)儀別為0:10、1:10、:10、3:10、:105:06:10比(BIO-EK SYNERGY)分別測(cè)定492、550mm及例向絲素溶液中加入相應(yīng)質(zhì)量的乙二醇,混合均勻70nm處的吸光度值(A)。千態(tài)透光率直接鋪板測(cè)后倒入聚苯乙烯塑料模具中,在室溫下于通風(fēng)櫥中定。測(cè)試濕態(tài)下的透光率時(shí),先將膜在去離子水中風(fēng)干即得共混膜。浸泡24h,再將其平鋪于培養(yǎng)板底,加入1mL去離1.2結(jié)構(gòu)表征子水進(jìn)行測(cè)試。不同波長(zhǎng)下各檢測(cè)4個(gè)孔,取平均使用全自動(dòng) X'PERT PRO MPD射線衍射儀(荷值。透光率T計(jì)算公式:蘭帕納科公司),CuKa射線,在管電壓40kV、管電T/%=10-×100(4)流35mA、掃描速度10°min的條件下,記錄得到1.6降解性2=5°~45°的衍射強(qiáng)度曲線。用 Nicolet5700f-i選取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的乙二醇共混膜分別用型傅立葉變換紅外光譜儀測(cè)試,將共混膜加工成直tris緩沖溶液和蛋白酶-XⅣ溶液降解,對(duì)照樣為用徑小于80μm的粉末后,KBr壓片制樣,測(cè)試4000~體積分?jǐn)?shù)75%乙醇浸泡2h的純絲素膜。將兩種材400cm吸光度得到共混膜的紅外吸收光譜。料于去離子水中浸泡72h后取出,干燥后稱取降解2 Journal of Silk綢男50年0第09期樣品0.1g置入離心管中,按浴比1:100分別向其中懸液,兩種材料各重復(fù)6孔,置于CO2培養(yǎng)箱中培加入10mL的tris緩沖溶液,2/mL的蛋白酶XⅣ養(yǎng),隔天換液。分別于1、3、5、7、9d,每孔加入溶液,放置于37℃的水浴恒溫震蕩器中降解,每?jī)商?0μL摩爾濃度為50mol/L的樹脂天青溶液,并于換液一次。分別于第1、3、6、9、12、15d取出樣品,每培養(yǎng)箱中孵育6h;在酶標(biāo)儀上測(cè)定其熒光強(qiáng)度個(gè)時(shí)間點(diǎn)重復(fù)3次,用去離子水充分洗滌后干燥并(flU值,激發(fā)波長(zhǎng)530nm,發(fā)射波長(zhǎng)590mm)(12稱重,計(jì)算出失重率,將第3d的樣品制成粉末用于測(cè)定細(xì)胞增殖率。X射線衍射。1.7細(xì)胞相容性2結(jié)果與分析將含乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的絲素溶液直接2.1絲素蛋白膜的結(jié)構(gòu)加入24孔板風(fēng)干成膜,對(duì)照樣為經(jīng)體積分?jǐn)?shù)75%乙二醇/絲素共混膜的X衍射曲線和紅外光譜乙醇處理過的純絲素膜。取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的圖分別如圖1(a)和圖1(b)所示。由圖1(a)中可以L929細(xì)胞,胰酶消化后用完全培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸看出純絲素膜主要以無定形結(jié)構(gòu)為主,曲線b~g均液,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×103個(gè)/mL,每孔加入mL在12.2°、19.7°、24.7°、28.2°、32.3°、36.8°處有衍細(xì)胞懸液,兩種材料各重復(fù)4孔,置于CO2培養(yǎng)箱射峰出現(xiàn),這說明乙二醇主要是誘導(dǎo)絲素蛋白由無中培養(yǎng)。分別于接種后1、3、5h計(jì)數(shù)未黏附的細(xì)胞規(guī)結(jié)構(gòu)向 Silk結(jié)晶結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變;另外當(dāng)乙二醇/絲素?cái)?shù),計(jì)算細(xì)胞的黏附率。取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的L929質(zhì)量比為5/10、6/10(圖中的f,g)時(shí),20在9.1°出細(xì)胞,胰酶消化后用完全培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,調(diào)現(xiàn)了silkⅡ的衍射峰,說明隨著乙二醇濃度的升高,整細(xì)胞濃度為2×104個(gè)/mL,每孔加入200μL細(xì)胞逐漸形成SilkⅡ型結(jié)晶結(jié)構(gòu)。1653.81629.312421541.9買線01020304030405018001600140012001000800600衍射角)(a)X衍射曲線波數(shù)cm(b)紅外光譜圖曲線ag中,m乙醇絲素0:10,1:102:103:10:10,5:10,6:10圖1絲素蛋白共混膜的結(jié)構(gòu) Fig. 1 Structure of blend silk fibroin membranes由圖1(b)可以看出,純絲素膜的紅外吸收峰在膜的吸收峰位置相近,由于在紅外譜圖上難以區(qū)分1651.5cm-1(酰胺I),1542cm-(酰胺Ⅱ,a螺旋與無規(guī)卷曲,結(jié)合前面的X射線衍射結(jié)果,可1244cm(酰胺Ⅱ),屬于無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)3。乙二以得出這3種比例的乙二醇/絲素共混膜中的絲素醇/絲素質(zhì)量比為1/10、2/10、3/10(圖中的b,c,d)時(shí),蛋白均為α螺旋構(gòu)象。當(dāng)乙二醇/絲素質(zhì)量比為共混膜中的絲素蛋白在酰胺I酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ區(qū)的吸4/10、5/10(圖中的,f)時(shí),共混膜在酰胺I酰胺Ⅱ收峰均在1653.8、1541.9、1242cm附近,與純絲素區(qū)的吸收峰變寬;繼續(xù)增加乙二醇的濃度,共混膜逐3第50卷 Vol.013年0月綢 Journal of Silkno.09sep2013漸在1629cm-處出現(xiàn)新的吸收峰,1653.8cm處醇/絲素質(zhì)量比為6/10時(shí),質(zhì)量損失率約為20%,故的吸收峰也逐漸變?nèi)?這說明,當(dāng)乙二醇/絲素質(zhì)量可知共混膜中的乙二醇還有部分未溶出。比超過4/10時(shí),共混膜中的a螺旋構(gòu)象逐漸減少,B100100折疊構(gòu)象逐漸增多。8070由此可知,當(dāng)乙二醇濃度較低時(shí),其主要促進(jìn)絲606050素蛋白由無規(guī)結(jié)構(gòu)向 Silk結(jié)晶結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,而當(dāng)乙二40水系檻40醇/絲素為6/10時(shí),有部分絲素蛋白向SilkⅡ結(jié)晶結(jié)3020構(gòu)轉(zhuǎn)變。003.2溶失率102030405060102030405060乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)%乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)%乙二醇/絲素共混膜的熱水溶失率如圖2所示。(a)絲素蛋白溶失率(b)絲素膜質(zhì)量損失率在圖2(a)中可以看出,乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%時(shí),圖2絲素蛋白膜的溶失率共混膜的絲素蛋白溶失率就從純絲素膜的90%降至 Fig. Dissolve-loss rate of silk fibroin membranes5%以下,繼續(xù)增加乙二醇的含量,絲素蛋白的溶失3.3力學(xué)性能率幾乎不變。因此可知,當(dāng)加入的乙二醇的質(zhì)量占乙二醇/絲素共混膜在干態(tài)和濕態(tài)下的力學(xué)性絲素蛋白質(zhì)量的10%時(shí),絲素膜就開始不溶,可以能如圖3所示。在干態(tài)下,共混膜的強(qiáng)度隨著乙二通過將乙二醇與絲素蛋白共混解決絲素蛋白的水溶醇含量的增加而下降,應(yīng)變則隨著乙二醇含量的增性問題。加先增大后減小,這說明乙二醇對(duì)絲素蛋白起到增在圖2(b)中,乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%時(shí),共混塑作用。同時(shí)可以看出,當(dāng)乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%膜中的乙二醇幾乎全部溶出,隨著乙二醇濃度的升時(shí),共混膜柔韌性最好,所以可以通過調(diào)控乙二醇的高,共混膜的質(zhì)量損失率呈緩慢上升趨勢(shì),當(dāng)乙二質(zhì)量分?jǐn)?shù)來制備出所需的力學(xué)性能的絲素蛋白膜。60斷裂強(qiáng)度114012斷裂強(qiáng)度200-斷裂伸長(zhǎng)率12-斷裂伸長(zhǎng)率1801600014004000證120606100海藍(lán)業(yè)02.00008642iozo3o4o《so《6《020304050《0乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)%乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)%(a)干態(tài)力學(xué)性能(b)濕態(tài)力學(xué)性能圖3絲素蛋白膜的力學(xué)性能 Fig. 3 Mechanical property of silk fibroin membranes從圖3(b)中可以看出,在濕態(tài)下,共混膜的強(qiáng)度混膜在450500、700m波長(zhǎng)下的透光率如圖4所示。隨著乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增大而下降,伸長(zhǎng)率變化的由圖4(a)可以看出,在干態(tài)下,共混膜的透光率極好,規(guī)律也是如此。均在90%以上,且乙二醇含量的增加對(duì)干態(tài)透光率影3.4透光性響不大。由圖4(b)可以看出,與千態(tài)相比,共混膜濕人眼角膜的透光率隨著波長(zhǎng)的增加而上升,在態(tài)透光率略有下降但仍有著較高的透光率,且其透光450nm處約為80%,在500mm處接近90%,700m率均在90%以上由此可見,乙二醇絲素蛋白共混膜以上時(shí)透光率趨于穩(wěn)定約為95%141干、濕態(tài)下的共透光率接近人的角膜,可望用于人的眼角膜修復(fù)材料。 Vol.50No.09.sep.2013 Journal of Silk第50卷2013年09月第09期95c95b90a8585102030405060102030405060質(zhì)量分?jǐn)?shù)/質(zhì)量分?jǐn)?shù)%(a)態(tài)透光率(b)濕態(tài)透光a.492nm;b.550nm;c.700nm圖4透明絲素蛋白膜的透光性 Fig.4 Light transmission of transparent silk fibroin membranes3.6體外降解100乙二醇/絲素共混膜在蛋白酶XV溶液中的降解情況如圖5所示。純絲素膜和乙二醇/絲素共混80膜在tris緩沖溶液中幾乎不降解。從圖5(c)可以看口純絲素膜6030%乙二醇絲素出,純絲素膜在蛋白酶溶液中,質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈線性下降,在第15d的時(shí)候,質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降至50%左右共40混絲素膜則在降解第1d的時(shí)候,質(zhì)量分?jǐn)?shù)就下降至35%左右,在第3d時(shí),下降至13%左右,最后在第206d時(shí)幾乎全部降解,質(zhì)量分?jǐn)?shù)還剩6%左右,之后質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化不明顯?？梢姷鞍酌竂V對(duì) Silk結(jié)構(gòu)的絲素膜降解作用較強(qiáng)。培養(yǎng)時(shí)間/h100:圖6L929細(xì)胞在透明絲素膜上的黏附率0 Fig.6 Cell attachment of L929 cells on transparent silk fibroin70 membranes50用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài),如圖740所示。從圖7可以看出,第1d時(shí),細(xì)胞數(shù)目較少,不3020同材料間沒有明顯差異;第3d時(shí),細(xì)胞數(shù)目明顯增10d多,說明兩種材料增殖均較好,純絲素膜和共混膜上00123456789101112131415降解時(shí)間d的細(xì)胞形態(tài)較好,細(xì)胞呈梭形、三角形以及多邊形,a.純絲素膜在tris緩沖溶液的降解;b.30%的乙二醇/絲素共混膜分散也較均勻;培養(yǎng)第5d時(shí),兩種材料上的細(xì)胞均在tis緩沖溶液中的降解;c.純絲素膜在蛋白膜溶液中的降解;鋪滿整個(gè)視野,并開始有圓縮細(xì)胞產(chǎn)生,細(xì)胞數(shù)目沒d.30%乙二醇/絲素共混膜在蛋白膜溶液中的降解有明顯差異。總體看來,共混膜上的細(xì)胞不僅形態(tài)圖5絲素膜在降解過程中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化 Fig. 5 Weight changes of silk fibroin membranes during絲素 enzymatic degradation3.7細(xì)胞相容性L929細(xì)胞在兩種絲素膜上的黏附率如圖6所示。從圖6可以得知,細(xì)胞在共混絲素膜上的黏附乙二醇絲素率較好,在1h后就達(dá)到了80%以上,并隨著時(shí)間的 ld 3d 5d增加繼續(xù)增加。通過SPSS軟件分析,乙二醇共混膜圖7L929細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同天數(shù)的生長(zhǎng)形態(tài)與純絲素膜的細(xì)胞黏附率無顯著性差異,但要優(yōu)于Fig.7 Phase contrast light microscope images of929cel純絲素膜。 cultured different days on different silk fibroin membranes5第52013年綢 Joumnal of Silkc0e01良好,且能夠很好地分散在膜上各處,說明共混膜能 silk proteins Progress in Polymer Science2 2039夠很好地支持細(xì)胞的生長(zhǎng)。1093-1115lU值的大小反應(yīng)了活細(xì)胞的數(shù)量,如圖8所4]Vhux, WANG,eta. l Water-insoluble silk films示。從圖8可以看出,L929細(xì)胞在共混膜上的增殖 with silk I structure [J]. Acta Biomaterialia, 2010,6(4)::1380-1387較好,在第5d和第7d時(shí),略好于純絲素膜。經(jīng)統(tǒng)計(jì)[UNGER, WOLF PETERS, et al Growth of分析可知,兩者沒有顯著性差異。 human cells on a non-woven silk fibroin net: a potential for14000純絲素膜 use in tissue engineering[j]. Biomaterials,2004,25(6):1200030%乙二醇/絲素1069-1075.10000 [6]MADDEN P W, LAI N X, GEORGE A, et al. Human8000 corneal endothelial cell growth on a silk fibroin membrane6000] Biomaterials,20132(1):407640844000 [7] LA WRENCE B D, MARC RCHANT J K, PINDRUS M A, et al2000 Silk film biomaterials for comea tissue engineering [J]. Biomaterials,2009,30(7):1299-130805 [8] KWEON H, HA H C, UM I C, et al. Physical properties of培養(yǎng)天數(shù)d silk fibroin/chitosan blend films J]. Journal of Applied圖8L929細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同天數(shù)的FLU值 Polymer Science, 2001, 80(7) 928-934. Fig.8 Fluorescence value of L929 cells cultured different days [9 SHE Z, ZHANG, JIN C, et al. Preparation and in vitro on different silk fibroin membranes degradation of porous three-dimensional silk fibroin/chitosan由上可知,共混膜在黏附率和細(xì)胞增殖上與純 scaffold. Polymer Degradation and Stability,2089絲素膜均沒有顯著性差異,但又略優(yōu)于純絲素膜。(7):1316-1322另外,共混膜在乙二醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%時(shí)即不溶于10]羅敏清,張岑岑,毛麗,等水不溶性透明絲素蛋白膜的制備及性能[J].高分子材料科學(xué)與工程,2011,27(8):水,且柔軟性明顯優(yōu)于純絲素膜,在生物材料上的應(yīng)141-145用更加廣泛。 LUO Minqing, ZHANG Cencen, MAO Li, et al. Preparation of transparent water-insoluble silk fibroin films [J]. Polymer4結(jié)論 Materials Science and Engineering, 2011,27(8) 141-145.11]劉宇清,于偉東,孫東豪聚乙二醇一絲素共混膜物理性1)乙二醇/絲素共混膜的絲素溶失率小于2%,能的研究[]東華大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2003,29(6):具有較高的強(qiáng)度與較好的斷裂伸長(zhǎng)率,在干濕態(tài)下100-103.的透光率都超過90%,滿足角膜修復(fù)材料的要求。 LIU Yuqing, YU Weidong, SUN Donghao. Study on2)乙二醇/絲素共混膜的主要結(jié)晶結(jié)構(gòu)為SilkI physical properties of poly ethylene glyeol -silk fibroin在tris緩沖溶液中幾乎不降解,在蛋白酶中降解性 polyblend membranes J]. Journal of Donghua University: Natural Science Edition, 2003, 29(6): 100-103.較好。 [12]ANOOPKUMAR-DUKIE S, CAREY J B, CONERE T, et3)乙二醇/絲素共混膜,能夠很好地支持成纖維 al. Resazurin assay of radiation response in cultured cells細(xì)胞在其上的黏附與增殖,細(xì)胞相容性良好。 [] The British Institute of Radiology, 2005, 78 (934):945-947.參考文獻(xiàn):[3] WEI, HUANG,mal,etal. Structure regulation] VEPARI C, KAPLAN D L. Silk as a biomaterial[ J]. Progress of silk fibroin films for controlled drug release[J]. Journal in Polymer Science, 2007,32(8) 991-1007. of Applied Poly ymer cience,2012,125(s2):ea77-e484 [2]WENK E, MERKLE H P, MEINEL L. Silk fibroin as a [14]VAN DEN BERG T, TAN K. Light transmittance of the vehicle for drug delivery applications]. Joumal of human cormea from 320 to 700 nm for different ages J] Controlled Release, 2011, 150(2): 128-141. Vision Research, 1994,34 11) 1453-1456 [3]HARDY J G, SCHEIBEL TR. Composite materials based on6