中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志Joumal of Experimenal Hematology 2008; 16(3):721 -724.●.721●文章編號(hào)( Aticle ID) :1009 -2137(2008)03 -0721 -04●綜述●血小板添加劑研究進(jìn)展扈文博,韓穎軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血醫(yī)學(xué)研究所,北京100850摘要使用血小板添加劑(PAS)部分或者全部替代血漿常溫保存血小板具有許多優(yōu)點(diǎn),例如可以避免輸注大量血漿引起的發(fā)熱、過敏反應(yīng)以及循環(huán)超負(fù)荷;另外可以改善保存環(huán)境使血小板活性與止血功能維持在較高水平,節(jié)省大量血漿用于其他目的,便于血小板制品病原體滅活等。近20余年來,對(duì)于血小板添加劑的研究一直是一個(gè)熱點(diǎn),不同配方的血小板添加劑不斷有報(bào)道,對(duì)血小板的保護(hù)效果也越來越好。本文就對(duì)血小板添加劑的組成成分、各成分的作用、體內(nèi)外保存效果等研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。關(guān)鍵詞血小板;血小板添加劑;血小板常溫保存中圖分類號(hào)R331. 143文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼Advances of Studies on Platelet Additive Solutions-- -ReviewHU Wen-Bo, HAN YingBejing Instinute of Transfusion Medicine , Bejing 100850, ChinaAbstract Platelet aditive solutions( PAS)can partly or fully substute blood plasma during platelet storage in nor-mal air temperature. There are some advantages such as avoiding transfusion of large volume of plasma with posible ad-verse reactions and circulatory overload, saving plasma for other purposes , improving storage conditions, maintaining theviabity and haemostaic function of platelet al normal level, and making it easy to inactivate pathogens. There has beenan increasing interest in the study of PAS in the past 20 years, the compositions of dfferent PAS have been reported oneafter another, and the protecive efectst of PAS on platelets have become better and btter. This article focuses on the ad-vances of studies of the composition of PAS , the functions of the diferent compositions and platelet quality in vitro andin vivo after storage.Key words plaletet; platelet additive solution; platelet normal temperature storageJ Exp Hemaol 2008; 16(3):721 -724隨著輸血技術(shù)的不斷發(fā)展,濃縮血小板( platelet血小板添加劑的研究歷史concentrate, PC)在輸血治療中發(fā)揮了越來越重要的作用。如何有效的保存血小板是人們重點(diǎn)關(guān)注的自1980年,Rock等開始PAS的研究工作,并于1985問題。目前臨床常用的血小板保存方法為20-年提出使用PAS保存血小板的理論;1987年Holme24C常溫振蕩保存"。利用此方法,機(jī)采血小板可等首先使用含有枸櫞酸鹽、碳酸鹽和葡萄糖的PAS以保存5-7天,而手工分離血小板的保存時(shí)間更作為添加劑,22C保存血小板7天,并與血漿保存組短。保存時(shí)間過短造成血小板的大量浪費(fèi)并加重其進(jìn)行了保存效果的比較,其血小板ATP含量和低滲供應(yīng)的不足。同時(shí),血漿懸浮保存血小板輸注人體休克反應(yīng)( HSR)均無明顯差別; Eriksson等在1990后還存在發(fā)生非溶血性發(fā)熱反應(yīng),過敏反應(yīng),循環(huán)超年在PAS中加入了Na、K等離子,229C保存血小板負(fù)荷等副作用的風(fēng)險(xiǎn)。Rock 等人于1985年提出使7天,測(cè)得血小板的平均回收率為65% ;同年，Eriks-用血小板添加劑( platelet additive solution, PAS)部son與Hogman在PAS中加人了乙酸鹽;1993年,分或者全部替代血漿保存血小板的理論,以延長(zhǎng)血uliksson等研制出血小板添加劑I (PASI),PAS小板的保存時(shí)間,維持血小板的活性,減少輸注血漿I保存的血小板與血漿保存的血小板相比,在代謝、引起的副作用并使光化學(xué)方法對(duì)血小板進(jìn)行病原體形態(tài)及功能方面的父種比壇規(guī)著降低,但是PAS滅活成為可能。20多年來, PAS經(jīng)過不斷的改良, .I保中國(guó)煤化工于規(guī)定的最低標(biāo)其保存血小板的效果越來越好,各種新型的PAS不MYHCNMHG斷被報(bào)道,現(xiàn)就這方面的研究做一-綜述。通訊作者:韓穎,主任研究員、電話:(010)669322000 E-mail:; hany-ing1001 @ yaboo. com2008-01 -09收稿;2008 -02 -01接受●722●中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志J Exp Hematol 2008; 16(3)準(zhǔn)[2-4)。隨后,研究者們對(duì)PAS I保存血小板的功主要 有兩個(gè)作用:①乙酸鹽同樣可以通過三羧酸循能進(jìn)行了大量的研究,并在此基礎(chǔ)上對(duì)PAS進(jìn)行改環(huán)進(jìn)行代謝 ,分解為水和二氧化碳而不會(huì)有乳酸的良,不斷有新的、保存效果更好的PAS被報(bào)道。下產(chǎn)生,因此PAS中的乙酸鹽可以減少血小板保存過表為國(guó)際上具有代表性的血小板添加液的組方。程中產(chǎn)生的乳酸。有研究表明乙酸鹽可以引起PAS中的氧消耗增多,從而使得血小板活性下降,所以乙Table . Compostion of platelet additive solutions in com-酸鹽不能完全替代葡萄糖門!;②穩(wěn)定pH,乙酸鹽可mon use以轉(zhuǎn)化為碳酸鹽,從而對(duì)抗保存過程中的pH下PAS-IIPAS-IM/降'8]。(T-Sol)PAS-II CompoeolNacC( mmol/L)115.577.3)069.3枸櫞酸鹽KCI( mmoVL)NAs5枸櫞酸鹽除有抗凝功能之外,其作用主要體現(xiàn)在與MgCI2( mmolVL)NA NA 1.51.5其他成分協(xié)同作用上。比如,有研究表明枸櫞酸鹽Na-citrate( mmol/L)10.8 10.9與鎂離子同時(shí)存在可以減少鉀離子的外流;而枸櫞NaH,PO/Na, HPO酸鹽和乙酸鹽一起可以減少血小板新陳代謝過程中VA 28.226( mmo/L)乳酸的生成[’。Na-aectate( mmol/L)3032.5?7pHNagluconat( mmol/L)IAN13pH的穩(wěn)定對(duì)于血小板是非常重要的,當(dāng)pH降到6.0以下時(shí)，血小板的活性就逐步喪失,包括腺嘌呤目前在英國(guó)被批準(zhǔn)的PAS有:PASII(Guliks-核苷酸濃度的下降,乳酸生成的下降和血小板的分son,1993) .PAS M ( Lin L, 1997)、Composol( van-der解等?，F(xiàn)階段的PAS的緩沖能力相對(duì)血漿是比較Meer ,2001 )、PAS皿M ( ulliksson ,2002)。 從研究弱的,血漿pH達(dá)到6.0時(shí)其中被緩沖的乳酸濃度范圍來看,西歐與北歐研究者對(duì)于PAS的研究比較大約是30 mmo/L,而PAS的pH達(dá)到6.0時(shí)其中被多,而美國(guó)研究者的報(bào)道較少(Joseph,2006)。使用緩沖的乳酸濃度只有10- 15 mmol/L。pH下降的PAS替代血漿保存濃縮血小板有以下的優(yōu)點(diǎn):①改原因主要是由于血小板代謝過程中的乳酸蓄積,乳善血小板保存條件,保持血小板活力和止血功能接酸來自于葡萄糖的無氧酵解,而當(dāng)血漿或者PAS中近正常水平;②減少大量血漿輸注帶來的不良反應(yīng)的葡萄糖耗盡,乳酸的濃度也就不會(huì)進(jìn)一步的增加。和循環(huán)的超負(fù)荷;③減少血小板輸注時(shí)的血漿量;④但最近也有學(xué)者報(bào)道,pH的下降只是血小板保存損便于光化學(xué)方法滅活PC中的病毒和其他病原體。傷的一個(gè)結(jié)果,而不是血小板保存損傷的原因,過高或過低的pH都會(huì)誘導(dǎo)糖酵解(°]。這樣的結(jié)果與.影響血小板添加劑效果的因素以前研究得出的結(jié)論相矛盾,仍需要研究者們進(jìn)一步的研究。葡萄糖葡萄糖是血小板新陳代謝的作用底物,為血小板活磷酸鹽性的維持提供必要的能量。葡萄糖通過兩種途徑進(jìn)磷酸鹽-方面作為PAS的緩沖體系,緩沖由于血小行代謝,一種是三羧酸循環(huán)途徑代謝為水和二氧化，板代謝產(chǎn)生乳酸所引起的pH下降,另一方面還可碳,另外一種是糖酵解的方式分解為乳酸。乳酸蓄以刺激血小板的新陳代謝,維持血小板的活性。積過多會(huì)導(dǎo)致添加劑中pH值下降,從而影響血小PASMI是在PASI基礎(chǔ)上加入了一定比例的磷酸板的活力。另外,研究也表明,在血小板保存過程鹽,其保存血小板的效果比PAS I要好，因此磷酸鹽，中,85%的葡萄糖通過三羧酸循環(huán)分解'!,在保存更適合用于不含磷酸鹽的ACD抗凝血小板的保存過程中如果葡萄糖耗盡,同樣會(huì)影響血小板的活中[。力6]。因此,在血小板保存過程中提供足夠的葡萄中國(guó)煤化工糖維持血小板的新陳代謝是很有必要的。鉀離最新:MYHLCNMHG加入了鉀離子和乙酸鹽鎂離子,與PAS I以及PASI相比,使用PASHM?，F(xiàn)今流行的PAS中大多都含有乙酸鹽,它在PAS中存的血小板可以降低葡萄糖的消耗,減少乳酸的生血小板添加劑研究進(jìn)展●723●成,更好的維持pH、低滲休克反應(yīng)(HSR)及血小板體內(nèi)實(shí)驗(yàn)(n=21),把PAS II保存的濃縮血小板與的活性2]。但是, PASH M保存的血小板在聚集和血漿保存的濃縮血小板輸人癥狀較輕的血小板減少粘附功能.上有所降低。有研究表明,加人80% PAS癥患者體內(nèi),1小時(shí)與24小時(shí)血漿保存組校正血小MM與加入70%PASm保存血小板的效果相同,推板計(jì)數(shù)增值(CCI)要高于PASI保存組(p<0.05),測(cè)鉀離子和鎂離子是通過影響血小板膜的功能而產(chǎn)但PASI保存組輸血反應(yīng)的發(fā)生率要低于血漿保存生的作用，比如鎂離子可以降低血小板膜的鉀離子組(p<0.05)。2006年Kerkhoffs 等160進(jìn)行了類似外流,但是這方面的報(bào)道較少,需要更深--步的研實(shí)驗(yàn)的報(bào)道,得出的結(jié)論也基本相同。究。EuroSPRITE與SPRINT兩組實(shí)驗(yàn),對(duì)使用光化學(xué)方法滅活病原體(人工合成的補(bǔ)骨脂素(S-59)聯(lián)血漿合紫外線照射)的PAS II保存的血小板與血漿保一般情況下PAS可以替代80%的血漿保存血小板，存的血小板輸人血小板減少癥患者體內(nèi)進(jìn)行比較，但是血漿在血小板的保存過程中依然是必需的，血并分別在2003年與2004年做了報(bào)道。在Eu-漿可以降低血小板進(jìn)行糖酵解的比率以及提供額外roSPRITE實(shí)驗(yàn)中, PAS II保存的血小板1小時(shí)的的代謝底物。有文獻(xiàn)報(bào)道,使用100%的ComposolCCI與血漿組比較沒有顯著差異(CCI五漿=14.9,和PAS皿M保存濃縮血小板48小時(shí)后,血小板活性CCIpAs=13. 1。p=0.11);而在SPRINT實(shí)驗(yàn)結(jié)果幾乎完全喪失1)。但是使用100% PAS替代血漿保中,血漿保存組1小時(shí)與24小時(shí)的CCI要高于PAS存的血小板對(duì)于治療--些血小板輸注無效、輸血相II保存組(p <0.001)。兩組實(shí)驗(yàn)中,PAS I保存血關(guān)的急性肺損傷免疫球蛋白A缺陷和過敏患者還小板輸注患者體內(nèi)輸血反應(yīng)發(fā)生率都要低于血漿保是非常有意義的。存組(p <0.05)17.18。由于兩組實(shí)驗(yàn)存在矛盾之處,研究者又在進(jìn)行新的三期實(shí)驗(yàn)，以得到更為確切血小板保存袋現(xiàn)階段的PAS配方還遠(yuǎn)稱不上完善,由于其緩沖效的結(jié)果[9]。果相對(duì)血漿來說比較差,因此需要配合透氣性比較血小板添加劑研究中需要解決的問題好、表面積比較大的血小板保存袋使用,加快氧氣和二氧化碳的交換,才能夠更好地維持保存液的pH,-種有效的血小板添加劑需要具備以下的條件:①這也增加了血小板保存的成本。目前血小板保存袋的材料主要為加人不同增塑劑的聚乙烯與聚烴烯兩在保存的全過程都具有充足的血小板新陳代謝底種,以聚乙烯為主要材料的血小板保存袋比聚烴烯物;②具有良好的緩沖體系,以緩解血小板保存過程保存袋有著更好的透氣性,但是普通的聚乙烯血小中pH的降低;③有促進(jìn)有氧氧化和/或抑制無氧酵板保存袋中含有的增塑劑磷二苯二酸二脂( DEHP)解的能力,降低血小板保存過程中乳酸的生成,減少具有較強(qiáng)的肝臟毒性,限制了其應(yīng)用,目前研究者已葡萄糖的消耗;④抗凝以及抑制血小板在保存過程經(jīng)找到數(shù)種毒性更低的增塑劑( di-undecyl-thereph-中活化的作用;⑤保持血小板的形態(tài)和活性的完整。thalate等)以取代DPHP。Cardigan 等[14]在2007年目前的各種血小板添加劑仍然有-些需要解決的問對(duì)兩種同血小板添加劑( PAS-1I、Composol)在3 種題。第一,使用血小板添加劑保存的血小板在部分不同血小板保存袋( Fresenius, Baxter , Pall 公司產(chǎn)體內(nèi)外觀測(cè)指標(biāo)上要優(yōu)于血漿保存的血小板,但是品)中保存血小板效果進(jìn)行了評(píng)價(jià),發(fā)現(xiàn)不同的血仍有--些方面不如后者,比如使用PAS-II.Composol小板保存袋保存的血小板在pH,HSR,葡萄糖消耗,保存的血小板在體外對(duì)二磷酸腺苷(ADP)引起的乳酸堆積等方面都有一定程度的差別。de Wildt-促聚反應(yīng)活性比血漿保存的血小板有所降低('°]。Eggen等(2]、van der Meer等[在這之前也進(jìn)行過類第二,雖然PAS可以替代80%的血漿,保存的似的報(bào)道。血小板依然可以保持較好的活性,但是現(xiàn)階段使用PAS中國(guó)煤化工然是- -件很困難的用血小板添加劑保存血小板的臨床實(shí)事情:OHCNMHG:風(fēng)險(xiǎn)依然存在,無驗(yàn)法完第三,PAS保存的血小板臨床應(yīng)用效果存在分2000年,de Wildt-Eggen 等['5)報(bào)道了一個(gè)小規(guī)模的歧 ,有待進(jìn)-步驗(yàn)證?！?24●中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志J Ep Hematol 2008; 16(3)第四,目前還缺少血小板功能評(píng)價(jià)的的金標(biāo)準(zhǔn)。8 Shimizu T, Murpby s. Roles of actate and phophate in the succee臨床上常用的校正血小板計(jì)數(shù)增值(CCI)、血小板ful storage of platelet concentrates prepared with an acetale- containing24小時(shí)存活率、出凝血時(shí)間測(cè)定等都只能在某些方additive solution. Transfusion, 1993 ;33 :304 -310面反映血小板回輸體內(nèi)后的活性,但是由于血小板9 WeisFogh us. The efet of citate, calcium, and megesium ioon the potassium movement acroes the human platelet membrane.激活與抑制的機(jī)理尚未完全研究清楚,血小板回輸Transfusion, 1985 ;25 :339 -342后正常人與患者之間及不同患者之間體內(nèi)各項(xiàng)檢測(cè)10 Dekkers DW, De Cuype IM, van-der Meer PF, et al. Influence of結(jié)果也存在明顯的差異,建立一套評(píng)價(jià)血小板功能pH on sored human platelets, Tansfusio, 2007; 47:1889 - 1895的金標(biāo)準(zhǔn)依然很困難。11 Gullikson H, Larson s, Shanwell A. e al. A sytem for the supply第五,加入PAS時(shí)間也是個(gè)需要注意的問題,of platelets suspended in a slorage medium including bufy-coat- de-有研究顯示,分別在制備好血小板2小時(shí)和8小時(shí)rived platelet concentrales in combination with " split" apheresisplatelets. Transfus Sei, 1997; 18:33 -40的時(shí)間點(diǎn)上加人PAS,8小時(shí)加人組與2小時(shí)加入12 Diedrich B, Sandgren P, Janson B. et al, In viro and in rivo efects組相比,乳酸的產(chǎn)生量顯著增高,pH下降顯著降低,of potaseium and magnesium on storage up to 7 days of apheresis提醒在制備血小板的過程中要盡早加入PAS以維platelet concentrates in platelet additive solution. Vox Sang, 2008;94:96 - 102持血小板的活性[21]1?？傊?PAS常溫保存血小板可以延長(zhǎng)血小板的|3 RingwaldJ, Athof F, Zinmermann R, e al. Washing plateletewith new additive solutions; aspects on the in viro quality after 48保存時(shí)間,同時(shí)又可以避免低溫保存血小板帶來的hours of storage. Transfusion, 2006;46 :236 - 243血小板的損傷和激活等問題,這是一種很有前景的14 Cardigan R, Sutherland J, Ganwood M, e al. In riro funcion'of血小板保存方法。buffy coat-derived platelet concentrates stored for 9 days in Com-paSol, PASII or 100% plasma in three diferent storage bag. VaxSang, 2008; 94:103 -112參考文獻(xiàn)15 deWildr-Eggen J, Nauta s, Schnjver JC, e al. 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