第24卷第12期第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報Vol.24，No. 122002年12月ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAEDee. 2002-推測我們進一步采用純乙醇固定細胞后加用Tri-chemie acute renal failure in rat[J]. Kidney Int , 1994 A464):1 050-ton-100以增加抗體對細胞的通透性,染色后出現(xiàn)與1 058.[2] GailiJ , Coleh D , Rabiner I, et al. Redistribution and dysfunction ofGailit相同的實驗結(jié)果。實驗結(jié)果顯示，缺氧、氧化損integrins in cultured renal epithelial cells exposed to oxidative stres[ J ].傷后整合素a3的表達只存在分布的改變而無明顯強，AmJ Physiol , 1993 2641 Pt 2)F149- FI57.度變化活細胞僅缺氧組染色的原因源于活細胞對抗[3] Zuk A ,BonventreJ V , Brown D ,et al. Polarity , integrin , and extracellu-體分子不通透而在空間.上阻礙了細胞基底側(cè)表達的整lar matix dyamics in the postischemic rat kidneyC J]. Am J Physiol ,合素a3與其相應(yīng)抗體間的正?？乖贵w反應(yīng)所致。1998 275<3 Pr 1):C711- C731[ 4] Canfied P E , Geerdes A M ,Molitois B A. ffet of reversible ATP deple-活細胞僅缺氧組于細胞周邊染色更加證實在本實驗條tion on tight-junction integrity in LLC-PK1 cell[ J] Am J Physiol ,1991 ,件下缺氧后存在細胞整合素a3在側(cè)緣的重新分布表261(6Pr2)F1 038- FI 045.明損傷后確實存在著整合素分子分布的改變。通過我[5] Gumbiner B M. Cell adhesion : the molecular basis of tssue architecture們在體腎缺血再灌注損傷后整合素a3的免疫金銀染and morphogenesidJ] Cell ,1996 84( 3)345 - 357.[6] Lieherthal W , McKenney J B , Kieler C R ,et al. Betax1 integrin mediated色結(jié)果也顯示出明顯的細胞側(cè)緣及頂側(cè)的分布改變。adhesion between renal tubular cells after anoxic injury[ J]. J Am Soc本研究結(jié)果表明缺氧、氧化損傷后TEC整合素Nephrol 1997 82):175- 183.a3均可出現(xiàn)明顯的極性分布變化這種變化有可能是[7] Romanov V ,Noiri E ,Cerwinki G ,et al . Two novel probes reveal tubular導(dǎo)致細胞間粘附力增強而細胞與基底面粘附力減弱的and vascular Ang-Gly-Asp( RGD ) binding sites in the ischemic rat kidney. [J] Kidney-Int ,1997 ,521 )93- 102.的基礎(chǔ)。(編輯冷懷明)參考文獻:[1] Nori E, Cailit J, Sheth D,en al. Cyelic RCD pepides aneiorate is-AAAAIAAAAAAACAACAAAAAAAAAAAAAAAAE文章編號1000-50 2002 )12-1415-02口服聚乙二醇改性聚乳酸靶向分布實驗Studies on distribution of PELA after oral administration曾韋錕,任建敏,鄒全明(第三軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗系臨床微生物學(xué)及免疫學(xué)教研室重慶40038)聚乙二醇改性聚乳酸(PELA)是能在生物體內(nèi)被水解或酶器國產(chǎn)),低溫冷凍真空干燥器(國產(chǎn))CT機(德國西門子公.解后吸收并排出體外的高分子聚合物。它具有無毒、靶向、緩司》雄性小型豬,體重為20 kf第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心)。釋性等優(yōu)良性能,因此在載藥方面顯示出良好的應(yīng)用前景。通1.2 方法過控制制造工藝可以將其制成不同直徑大小的微球，從而產(chǎn)1.2.1 微球包裹泛影葡胺的制備方法參照文獻[ 2.3 ]制生不同的定位效果1。本研究試采用與人在解剖結(jié)構(gòu)上有較備低溫真空干燥貯存?zhèn)溆?。好可比性的小型豬為實驗對象采用造影劑示蹤法,從大體上1.2.2 微球的表征微球表面形態(tài)用AMRAY型掃描電子研究微球在動物胃腸道的靶向分布情況。顯微鏡照相觀察粒徑分布用WL-2激光粒度分析儀測定微球1材料和方法的粒徑M.D用LeitzDiaplan-光學(xué)顯微鏡目測,計 算得數(shù)均粒徑X即X=SX/n其中Xp為單個微球粒徑;X 為數(shù)均粒徑;n 為粒子數(shù)目(不少于150)結(jié)果平均粒徑為6.4 pumo1.1材料1.2.3動物實驗動物實驗前禁食1do經(jīng)口灌服20 ml液聚乙二醇改性聚乳酸PELA[ P( L-PEG2000X 95:5 )]:M,體石蠟油。全麻插胃管對照組灌服空微球( 20 g懸液實驗組2000-23000 (本室合成)泛影葡胺(濃度為60% )聚乙烯醇灌服PELA包裹物懸液20g微球內(nèi)含包裹的泛影葡胺約為10( PVA-1788 ) :中國石化總公司四川維尼綸廠生產(chǎn)。LeitzDiaplan-ml)。 于實驗第7天禁食。經(jīng)口灌服20 ml液體石蠟油。第8光學(xué)顯微鏡Wild MPS46、PHOTOAUTOMAT、Wild Leitz Wild天CT下觀察活體及胃腸組織(離體》MPS52照相設(shè)備德國生產(chǎn)。AMRAY 型掃描電子顯微鏡。WL2激光粒度分析儀,TV 顯微系統(tǒng)(重慶大學(xué)光電學(xué)院研制)可中國煤化工見/紫外分光光度計DU640(美國BECKMAN) ,低溫高速離心TYHCNMHG服PELA包裹泛影葡胺的機(美國BECKMAN )高速乳化制作器T25B(美國)真空干燥實驗組小型豬活體檢查可見局部腸壁密度增強,胃腸組織離作者簡介:曾韋镢1974- )男，貴州省貴陽市人碩士,醫(yī)師主要從事病原體下胃壁及小腸粘膜出現(xiàn)致密影。提示微球包裹物沿胃、腸微生物的檢測及預(yù)防等方面的研究。電話568753590壁沉積在小腸粘膜。收稿日期201-0606 修回日期2001-12-12(下轉(zhuǎn)1419頁)12期梁智勇等.應(yīng)用AFLP法檢測小鼠高、低轉(zhuǎn)移性肝癌細胞株基因組的遺傳差異結(jié)構(gòu)的破壞嚴重,-般不從銀染凝膠中回收DNA片(2)76- 80.段2。我們通過實踐建立了一種簡便的半玻板凝膠染[6] De Juan C ,Iniesta P ,Cruces J ,et al. DNA amplfication on chronosomne6p12 in non small cell lung cancer detected by arbitarily primed polymerase色法使銀染凝膠DNA片段的回收成為可能。半玻板chain reatio[J] Int J Cancer ,1999 84( 4 ) 344 - 349.凝膠染色使待回收片段不受銀離子破壞,并且連續(xù)點[7] Savelkoul P H M, Aarts HJ M, Hass J D, et al. Amplifedi fragment樣使對回收片段的定位準(zhǔn)確應(yīng)用這-方法我們成功lengh polymophism analysis :the State of an Ar[ J]. J Clin Microbiol ,地回收了4條片段。由于從聚丙烯酰胺凝膠回收的產(chǎn)1999 37X 10)3 083-3 091.物量常很低,需要進行PCR再擴增才能進一步應(yīng)用,[8] Lindsteda B Heira E , Vardunda T ,et al. A variation of the ampified -fragment length polymorphism( AFLP ) technique using three restriction en-我們將回收的4條片段再擴增均得到與目的片段大donucleases , and asessment of the enzyme combination Bgl-MfeI for小一致的產(chǎn)物。AFIP analysis of Salmonella enterica subsp. Enterica isolates[ J ] FEMS本實驗對回收的4條片段進行克隆經(jīng)篩選、鑒定Microbiol Lett 2000 ,189 1):19- 24.證實有1條回收片段克隆成功我們對其進行了測序。.[9]萬春玲朱玉芳譚遠德.AFLP標(biāo)記在研究家蠶遺傳多態(tài)性方面的應(yīng)用J]生物技術(shù), 19999 X5)4-9.通過GenBank用BLAST搜尋均未見同源性信息,我們[ 10] Allan B , Curtis C H. Carcinogenesis in mouse and human cells parallels目前還不能明確這條片段的價值,有可能是新的基因and paradoxe[ J]Carcngenesis 2000 21( 3)371 - 377序列,但還需要進一步驗證才能明確。[11] Yamasaki H , 0mori Y ,Zaidan-Dagli M L , el al. Genetic and epigneticchanges of itellular conmunication genes during mulistageC J]. Cancer參考文獻:Detect Prev , 1999 23(4)273 - 279.[12]張樹輝,史景泉,魏泓.小鼠高低轉(zhuǎn)移性肝癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究J]第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2000 22(1)64-67. .[ 1] Vos P ,Hogers R , Bleeker M ,et al. AFLP :a new technique for DNA fin-grpritin[ J] Nucleic Acids Res , 1995 ,23(21)4 407 - 4414.[ 13] Fukuda T ,Kido A , Kajino K ,et al . Cloning of dfreniall epressed gnes[2]金冬雁黎孟楓等譯.分子克隆實驗指南[ M].第2版.北京科學(xué)in highly and low mdastatic rat ostosaroms by a mndifiad cDNA-AFIP出版社1992.45- 60 325 - 33methoC[ J1 Biochen Bioplys Res Conmn , 1999 ,26K( 1)35-40.[3]肖翠英張思仲.PCR產(chǎn)物的克隆方法[J]中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,[ 14] Majina S , Kajino K , FukudaT ,et al. A novel gene rising dbl quote ,left1997 ,14(3):161- 165.( low )Niban" upregulated in renal carcinogenesis : cloning by the cDNA-[4]況少青張宇舟陳竺.基因組掃描 遺傳病相關(guān)基因定位的有利amplified fragment lengh polymorphism approaclC[ J]. Jpn J Cancer Res ,工具J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,997 ,14(2)99- 103.2000,91(9)869-874.[5]趙勇丁金鳳.尋找差異基因[ J].國外醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)分冊20000 23(編輯薛國文)(.上接1415頁)特點但是這種方法需要分批處死動物不利于動態(tài)觀察結(jié)果。而本實驗首創(chuàng)的造影劑示蹤法能夠從大體上動態(tài)觀測聚合物3討論的靶向作用并具有一定的靈敏度 尤其它可活體觀察的特點,使該方法可能在PELA的緩釋實驗中對連續(xù)動態(tài)觀察具有應(yīng)PELA具有無毒，可降解的優(yōu)點,通過控制合成條件,PELA用價值。微球可以制成不同粒徑的微球從而在機體組織內(nèi)具有不同的關(guān)鍵詞: PELA ;靶向?qū)嶒灠邢蛐岳肞ELA包裹抗原物質(zhì)可制備口服疫苗這種高分子中圖法分類號: R914文獻標(biāo)識碼:B具有抗酸作用微球口服后,包裹物不受胃腸道消化酶及酸性的影響因此能夠有效的運送抗原至粘膜部位,由于 PELA能夠生物降解可以在粘膜局部保持抗原的緩慢釋放,保證抗原的長效全程刺激免疫系統(tǒng),而且實驗還發(fā)現(xiàn)PELA抗原載體系統(tǒng)[1] Eldrdge J H , Stass J A , Meulbroek J A , et al . Biodegradable microspheres具有粘膜免疫佐劑效應(yīng)。因此微球載體在疫苗免疫接種中呈ad vaccine delivery systen[J]. Mol Inmunol ,1991 28(3 ) 287.現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。[2] Lim D W ,Park T G.Serecomplex formation betwen enantioeerie PLA-PEC-PLA tiblock copolymers :characterization and use as protein-delivery本實驗證明粒徑在6 pm左右的PELA包裹物,口服一-周mecroparticulate carier[J]. J Polym Sci 2000 752):1 615-1 623.后,PELA 可在胃及腸道粘膜沉積下來具有良好的胃腸道靶向[3] Hans K , Kricheldorf H R , Better D , et al . Ploylactones 2 3 polymeriza-性。能夠在CT下觀察到明顯的影像學(xué)改變,說明局部腸道對tion of racemic and meso D ,L-lactide with various catalysts stereo- chermical微球具有較好的捕獲作用。在國內(nèi)外的類似的研究中多采用aspects[J]. Ploymer ,1992 33(3)2 817- 2824.小型哺乳動物而本實驗采用的小型豬其免疫系統(tǒng)和消化器[4] Eyles J E ,illiamson E D , Alpar H O , et al . Immumologcal reponses to官在解剖、組織、生理代謝等方面與人類極為相似的。通過對nasal delivery of free and encapsulated tetanus toxoid : studies on the efct大型哺乳動物的研究,尤其是粒徑在6pum左右的微粒胃腸道of vehicle volumd[J]. Int J Phamm , 1999 ,189 1 ):75 -9.的靶向數(shù)據(jù)對聚合物的進一步 人體實驗具有-定的參考價[5]張文彬賈文祥劉聰?shù)?口服霍亂微球疫苗的制備極其靶向值。在類似的研究中聚合物的示蹤方法多采用熒光放射性標(biāo)中國煤化工-(1)31- 33.(編輯陳聰連)記法45]這種方法適用于局部、微觀檢測具有較高檢出率等"TYHCNMH G .