醫(yī)學(xué)信息2010年11月第23卷第11期Medical Information.Nov 2010. Vol. 23. No.11臨床醫(yī)學(xué)糞便軟化排出,或用肥皂水灌腸或肛門]內(nèi)使用開塞露促使排便。心表1本組患者死亡率及護(hù)理滿意度評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)動(dòng)過緩病人避免排便時(shí)過度屏氣，以免興奮迷走神經(jīng)加重心動(dòng)過疾病診斷患者人數(shù)死亡人數(shù)死亡率 護(hù)理滿意度緩。生活不能自理的老年患者的飲食、大小便、洗漱等均由護(hù)士協(xié)助急性心肌梗死8非常滿意完成。囑患者戒姻限酒,減少心血管病事件發(fā)生的誘因。并且要注意冠心病50口腔黏膜及皮膚的變化,及時(shí)進(jìn)行預(yù)防、護(hù)理。皮膚護(hù)理方面,應(yīng)保心絞痛_5持床鋪干沽,平整、無皺折,受壓處給予勤翻身、局部按摩等。對(duì)于手術(shù)病人還應(yīng)注意禁食時(shí)間。4討論2.4病情觀察護(hù)理心血管疾病常由某些因索誘發(fā)而加重,因此應(yīng)加由于護(hù)理對(duì)象是老年心血管疾病的患者，心血管疾病屬于危險(xiǎn)強(qiáng)對(duì)患者的觀察護(hù)理。首先應(yīng)嚴(yán)密關(guān)注患者的體溫、心率.血壓.血病癥,死亡率較高,這就要求護(hù)士要具備思維敏捷知識(shí)豐富、語言恰糖等生命體征變化,根據(jù)患者的全身情況制訂基礎(chǔ)護(hù)理的方案。同當(dāng)及技術(shù)嫻熟等良好的素質(zhì)和高尚的職業(yè)道德。從患者的角度出發(fā),時(shí)，及時(shí)了解患者不適主訴,如胸悶、胸痛、氣短.并觀察其部位,性讓其感受到家- -樣溫 馨的住院環(huán)境.醫(yī)護(hù)人員的細(xì)心體貼,做好每一質(zhì)及持續(xù)時(shí)間，及時(shí)通知醫(yī)生并采取措施。其次.要認(rèn)真觀察病情變位患:者的心理護(hù)理、生活護(hù)理和疾病的觀察護(hù)理。只有通過精心、耐化,掌握?？瞥Ｓ盟幍淖饔?、注意事項(xiàng)。心血管疾病藥物對(duì)老年患者心的護(hù)理,才能為患者減輕病痛,提高治愈率,同時(shí)可以縮短住院日,與中年患者在劑量上有很多不同，因此,應(yīng)根據(jù)老年人的排泄能力減少并發(fā)癥,促進(jìn)患者早日康復(fù)。差,腎功能減退的特點(diǎn),嚴(yán)格學(xué)握劑量密切觀察其精神狀態(tài)、血壓、參考文獻(xiàn):尿量及胃腸道反應(yīng),做好三查七對(duì),加強(qiáng)巡視,輸液時(shí)控制滴速,提[周麗霞等，對(duì)老年人心血管疾病的護(hù)理體會(huì)田中外健康文摘,2009,8.高靜脈穿刺成功率,保護(hù)好患者血管。(27):185-186.3結(jié)果[2]沈宏云,心血管疾病的個(gè)性化護(hù)理D.醫(yī)學(xué)信息,2010,23(2):206-207.本組198例患者，經(jīng)過治療護(hù)理后,除2例由于搶救無效死亡[3]王茵,心血管疾病患者的心理特點(diǎn)、生活質(zhì)量及護(hù)理對(duì)策[J.中國實(shí)用護(hù)理外,其余患者的病情均恢復(fù)穩(wěn)定出院.護(hù)理治療的有效率為98.98%。雜志，2009, 25(9):85-86.編輯/雅蘭本組患者死亡率及護(hù)理滿意度評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)如表1:常規(guī)PCR技術(shù)與單分子PCR技術(shù)劉連生(長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北荊州434023)摘要:常規(guī)PCR技術(shù)大都以大量DNA分子(一般為10個(gè)以上)為模板進(jìn)行DNA擴(kuò)增。單分子PCR技術(shù)是以極少量DNA分子(1、5或10個(gè)分子)為模板進(jìn)行DNA擴(kuò)增。在高保真度DNA聚合酶作用下,單分子PCR技術(shù)能擴(kuò)增出高度一致的DNA;在低保真度DNA聚合酶作用下。單分子技術(shù)又能構(gòu)建出大量突變基因的DNA文庫。關(guān)鍵詞:常規(guī)PCR;單分子PCR;DNA聚合酶PCR (polymerase chain reaction )的中文全稱為聚合鏈反應(yīng)。SM-PCR是基于常規(guī)PCR技術(shù)發(fā)展而來的,包括變性、退火、延PCR技術(shù)隨著自身的發(fā)展及其與已有分子生物學(xué)技術(shù)的結(jié)合衍生伸3個(gè)基本環(huán)節(jié),但在模板數(shù)量、引物設(shè)計(jì).DNA聚合酶選擇以及反了多種技術(shù),如逆轉(zhuǎn)錄PCR( reverse tasription PCR, PT-PCR ).原應(yīng)條件上與常規(guī)PCR存在較大區(qū)別。為PCR(in situ PCR )實(shí)時(shí)PCR(in situ PCR )等川。單分子PCR模板的準(zhǔn)備:SM--PCR是在DNA模板稀釋到極端條件下進(jìn)行(single moleular PCR, SM-PCR )技術(shù)是最近發(fā)展出的新的PCR的擴(kuò) 增反應(yīng).模板的質(zhì)量直接決定實(shí)驗(yàn)的成敗與擴(kuò)增效率。實(shí)驗(yàn)中,技術(shù)。該文將著重介紹常規(guī)PCR技術(shù)與單分子PCR技術(shù)要點(diǎn)、特點(diǎn)首先用限制性內(nèi)切酶消化質(zhì)粒DNA得到含有靶DNA的片段，經(jīng)常及其優(yōu)點(diǎn)。規(guī)PCR擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物再經(jīng)酚/氯仿抽提,酒精沉淀和HPLC等方式1常規(guī)PCR技術(shù)要點(diǎn)叫純化。純化的DNA用含0.1%(V/W)的藍(lán)色葡聚糖2000或1ng/LPCR反應(yīng)體系的基本成分包括:模板DNA、特異性引物、耐熱t(yī)RNA的TE溶液“稀釋到1個(gè)(或5個(gè),或10個(gè))分子/μl的終濃度。DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)、dNTP以及含Mg*的緩沖液。藍(lán)色葡聚糖2000或Ing/LtRNA的作用是為了防止DNA吸附于管模板DNA的變性模板DNA經(jīng)加熱至94c,使模板DNA雙鏈壁上,以保證模板DNA的正常變性.引物的退火以及鏈的延伸。完全變性或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈.同時(shí)引物的設(shè)計(jì): SM-PCR 反應(yīng)混合物中模板數(shù)極低，若引物之間引物自身以及引物之間的局部雙鏈也得以打開。存在少量配對(duì)序列,循環(huán)擴(kuò)增下極易形成二聚體。因此。在進(jìn)行引物模板DNA與引物的退火模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制其GC含量和Tm值,同時(shí)盡量避免引物間存在可度降至559C,引|物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。配對(duì)序列。實(shí)驗(yàn)證明，引物工作濃度在3μmo/L時(shí),可以得到理想的引物的延伸將溫度升至729C,DNA模板一引物結(jié)合物在PCR產(chǎn)物;高于或低于3μmo/L, PCR產(chǎn)物的數(shù)量都不理想!。TaqDNA聚合酶的作用下發(fā)揮酶活性，以dNTP為底物催化DNA的DNA聚合酶的選擇SM- -PCR反應(yīng)中模板數(shù)很少，循環(huán)數(shù)多，合成反應(yīng)。上述三個(gè)步驟構(gòu)成- - 個(gè)循環(huán),新合成的DNA分子繼續(xù)作dNTP損耗很為下一輪合成的模板,經(jīng)多次循環(huán)(25-30次)后即可達(dá)到擴(kuò)增DNA大,因此選擇何種:中國煤化工需要產(chǎn)生突變。片段的目的。在體外定向進(jìn)化中YHCN M HG變基因文庫,因2 SM- -PCR技術(shù)要點(diǎn)此,選擇低保真度TrspunA果口孵,共用大多八平小10/bp,擴(kuò)增效率為70%時(shí),將200bp長的片段擴(kuò)增- -百萬倍,產(chǎn)物錯(cuò)誤率達(dá)33%收稿日期:2010-09-21臨床醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)信息2010年11月第23卷第11期Medical Information.Nov. 2010. Vol. 23. No.11間。在基因組測序及法醫(yī)鑒定中，為獲得大量無突變,高度- -致的下連續(xù)反應(yīng)，顯著提高了PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性。PCR擴(kuò)增的特異PCR產(chǎn)物.通常選用高保真度pfuDNA聚合酶，其錯(cuò)誤參入率為7x性還依賴于兩個(gè)引物設(shè)計(jì)的好壞，依賴于引物與模板結(jié)合的準(zhǔn)確性。10-7hbp, 在同樣實(shí)驗(yàn)效率下將500bp 長的片段擴(kuò)增- -百萬倍,產(chǎn)物3.3操作簡便、快速整個(gè)PCR操作過程,從標(biāo)本處理、PCR擴(kuò)增到錯(cuò)誤率為0.7%m。產(chǎn)物分析?？稍?h內(nèi)完成全部實(shí)驗(yàn)。擴(kuò)增產(chǎn)物可直接供作序列分析反應(yīng)條件SM-PCR 的變性溫度(96- 98C)大多比常規(guī)PCR和分子克隆,擺脫繁瑣的基因分析方法,可直接從總RNA或DNA中(94C)高,其變性時(shí)間(5~ 15s )短于常規(guī)PCR(40),同時(shí)退火時(shí)間及或部分DNA已降解的樣品中分離目的基因,省去須先進(jìn)行克隆后再延伸時(shí)間也相應(yīng)縮短;常規(guī)PCR循環(huán)為3~5h,因此必須選擇熱穩(wěn)定作序列分析的模式。性好的DNA聚合酶。4 SM-PCR技術(shù)優(yōu)點(diǎn)0預(yù)防污染SM-PCR 中模板數(shù)量極少,少量污染都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)SM-PCR指的是以少量或單個(gè)DNA分子為模板進(jìn)行的PCR。產(chǎn)生錯(cuò)誤,甚至整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗。在處理樣品的過程中,微量移液器，4.1極少的模板數(shù),通常為1.5或者10個(gè)DNA分子?？諝獾葮O易造成樣品間的交叉污染。此外.試劑配制中也極易被污4.2更微型化的體系,SM-PCR體系大多在10ul 左右。染而導(dǎo)致SM-PCR污染。因此,實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意設(shè)陰性對(duì)照。4.3可構(gòu)建出大小可控的文庫，不同模板數(shù)構(gòu)建的文庫大小是不同3 PCR技術(shù)特點(diǎn)叫的，如DNA模板數(shù)位10個(gè)分子時(shí),文庫大小是模板數(shù)為1個(gè)分子的3.1敏感性高PCR產(chǎn)物的生成以指數(shù)方式增加，能將極微量的靶10倍DNA成百萬倍以上地?cái)U(kuò)增到足夠檢測分析量的DNA。這是PCR技參考文獻(xiàn):術(shù)最主要的特點(diǎn),它可對(duì)單拷貝基因、單個(gè)細(xì)胞、單根頭發(fā)、- -滴血[1]查錫良.生物化學(xué)[M]第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 209:4838 485.等微量標(biāo)本進(jìn)行分析。[2] 張杰道生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)PCR技術(shù)及應(yīng)用[M].科學(xué)出版社,2005:12-18.3.2特異性強(qiáng)自從提取出耐熱TaqDNA聚合酶以來，在熱變性處理[3] Yamane T, et al .Nippon Nofeik Kaishi , 2004,78(8):751-753.時(shí)不被消化,不必在每次循環(huán)擴(kuò)增中再加人新酶，以及在較高溫度[4]王國華,等生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展, 20.31(2);1592- 161.編輯/杜蘇利鼓室沖洗注藥治療分泌性中耳炎療效分析劉仁輝(四川省廣元市劍閣縣人民醫(yī)院耳鼻喉科,四川廣元628300)摘要:目的探討分析鼓室沖洗注藥治療分泌性中耳炎(SOM)的臨床療效。方法將臨床診斷為分泌性中耳炎的 223例患者隨機(jī)分為鼓室沖洗注藥組及常規(guī)治療組進(jìn)行臨床對(duì)照研究。結(jié)果鼓室沖洗注藥組和常規(guī)治療組兩組總有效率分別為91.3%和65.2%,鼓室沖洗注藥組的總有效率明顯高于常規(guī)治療組(P<0.01)。鼓室沖洗注藥組除耳內(nèi)短時(shí)間悶脹外,均未出現(xiàn)劇烈疼痛、鼓膜損傷、大出血和咽鼓管損傷等術(shù)中并發(fā)癥。常規(guī)治療組3例出現(xiàn)粘連性中耳炎,鼓室硬化。術(shù)后隨訪,兩組均未發(fā)現(xiàn)有咽鼓管狹窄等術(shù)后并發(fā)癥。結(jié)論鼓室沖洗注藥法治療分泌性中耳炎可明顯提高療效,具有操作簡單,療效可靠,更易于病人接受。關(guān)鍵詞:鼓室沖洗注藥法;分泌性中耳炎;常規(guī)鼓膜穿刺;療效分析本文對(duì)我院自2006年08月~2009年10月223例慢性分泌性出棉片,以6號(hào)細(xì)長針頭于鼓膜緊張部前下方或后下方刺人中耳腔，中耳炎患者進(jìn)行鼓室沖洗注藥治療,取得了理想的療效,現(xiàn)報(bào)告如輕輕回抽至吸出氣泡液體。鼓室注藥治療組:同上消毒麻醉,抽取地塞米松Iml ,a-糜蛋白1資料與方法酶5mg,6號(hào)細(xì)長針頭行鼓膜穿刺,將藥液緩慢注人鼓室,注藥后囑患1.1 - -般資料慢性分泌性中耳炎患者 223例，其中單側(cè)中耳炎患者頭偏向另一側(cè),按壓耳屏3~5次，患者可感到咽腔發(fā)苦或有藥液者188例,雙側(cè)中耳炎患者35例,共計(jì)258耳。男172例(單側(cè)157流出,此后回抽鼓室內(nèi)沖洗液,患者即刻可感到耳悶、脹感明顯減例,雙側(cè)15例),女51例(單側(cè)31例,雙側(cè)20例),年齡10-69歲,平輕。治療完畢,清除外耳多余藥液。1 次/周,2-4次為1療程。療程完均33歲。病程4d-11ao成后1周復(fù)查。兩組治療期間予以抗炎.抗組胺、稀化粘素.1%麻黃隨機(jī)將其分為兩組,鼓室沖洗注藥組和常規(guī)治療組,其中鼓室沖素滴鼻、抗生素.激素及配合鼓膜按摩,捏鼻鼓氣等治療。均囑患者洗注藥組109例(單側(cè)92例,雙側(cè)17例,共計(jì)126耳),男82例,女復(fù)診,1周未痊愈者再次同法治療,治療結(jié)束后復(fù)查純音測聽和聲導(dǎo)27例,年齡11-68歲,平均年齡32歲;常規(guī)治療組114例(單側(cè)96抗,療效判定標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)。例,雙側(cè)18例.共計(jì)132耳),男90例,女24例,年齡10-69歲,平1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.率的比較采用卡均年齡33歲。均有不同程度的上呼吸道感染史,鼻塞,耳鳴聽力下方檢驗(yàn)，P<0.05 ,表明兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。降,耳內(nèi)脹滿感,伴(或不伴)耳鳴。兩組病例在年齡、性別、病癥上差2結(jié)果別無顯著性(P>0.05)。2.1兩組患者治療療效的比較兩組總有效率 分別為91.3%和1.2方法常規(guī)治療組:采取常規(guī)鼓膜穿刺治療。患者取坐位,75%酒65.2%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)x檢驗(yàn)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且有顯著性意義(P<精消毒外耳道皮膚,2%丁卡因棉片貼敷鼓膜表面麻醉,10min后取0.01),具體見表1。表1兩組患者治療療效的比較組別耳數(shù)治愈(%)顯效(%)有效中國煤化工總有效率(%)常規(guī)治療組13260(45.5)10(7.6)16(12MYHCNMHG126(6.2)鼓室沖洗注藥組26102(81.0) _10(7.9)3(2.4)_ 11(8.7).115(91.3)收稿日期:2010- 09-214380 !